基因治疗（GT）终产品检测是考察批次的一致性的基础。产品检测主要从安全性、鉴别、纯度、效力等角度考虑。对于需要使用器械来递送的基因治疗产品，在启动临床I期安全性研究之前，需要确保产品与递送装置的兼容性。兼容性研究应该使用拟用于临床研究的最终配制的产品。
在上一期《奥来恩专家解读》FDA对基因治疗产品CMC研究的考量系列中，我们介绍了FDA对GT产品原材料、辅助试剂、生产耗材和内包材以及生产工艺与控制要求，详见《奥来恩专家解读》第59期，本期我们将继续介绍FDA对GT产品的检测以及与递送系统的兼容性的要点和针对特定疾病类型的CMC特殊考量，助力GT产品研发和早日成功上市。
GT产品的检测
GT终产品检测是考察批次的一致性的基础。产品检测主要从安全性、鉴别、纯度、效力等角度考虑。这里要强调的是效力检测。效力检测是个重要但方法开发很有挑战的评估方法，需要针对每个产品的作用方式（Mode of Action，MoA），FDA建议要尽早开始。在产品开发早期，效力检测可以用基因表达检测，但在开展申请上市许可需要的关键临床试验之前，应建立最终产品生物活性的效力测定方法并验证方法。基因产品检测的基本检测方法和规格设定可以参考2020年1月FDA指南中的GT产品检测要求。除此之外，具体检测项目的选择和规格设定还需要考虑具体GT产品的类型、疾病类型、产品给药途径、可给药的体积量等因素。具体阐述如下：
GT产品的类型多样，其中以CAR T和AAV产品居多。目前FDA批准上市的5款AAV基因产品中主要是不同血清类型如AAV2、AAV5、AAV9等AAV产品。对于AAV产品，一个重要的检测项是基因组滴度（Vg）检测。在IND阶段FDA要求提供基因组滴度（Vg）的方法验证方案和结果报告。方法验证要考察方法的准确度、精确度、特异性、线性和范围。此外，申请人还要提供基因组滴度（Vg）和总颗粒数（Cp）的比例。
具体检测项目的选择还需要考虑治疗的疾病类型。例如，针对治疗视网膜疾病（Retinal Disorder）的GT产品，FDA提出了一些特定CMC考量因素，如最终产品的配方与满足预设定剂量和体积的浓度，眼内给药的内毒素限量应遵循USP <771>中的规定（每只眼每次剂量不超过2.0内毒素单位（EU）或每毫升不超过0.5 EU），GT载体的终产品应进行悬浮颗粒物检测，检测方法与放行标准应遵循USP <789>，产品测试与放行时要检测最终产品配置（Final Product Configuration）等。
针对治疗神经退行性疾病（Neurodegenerative Disease）的GT产品，在大脑或脊髓等疾病部位可能仅能给予少量的给药体积。这些病症部位的产品清除率比较低，所以最终产品的体积和配方是重点考量因素。产品的CQA还可能影响最后产品配方参数，需要在生产工艺开发的早期就这些相关考量做出决策。
FDA建议所有用于神经退行性疾病的GT产品的设计应减少非预期的免疫反应，减少潜伏的可能性，并且不包含不直接有助于研究产品的生物学功能的外源基因（例如报告基因）。对这类GT产品，在产品开发早期，就要仔细评估GT产品纯度。纯度评估包括分析与产品相关的杂质（如不完整的病毒颗粒与细胞亚型）和与生产工艺相关的杂质（如残留宿主细胞蛋白、宿主细胞DNA、内毒素）。鉴于这类产品的用药部位和在神经元组织中低清除率的特点，宿主细胞DNA杂质可能会长期存在并可能导致不良反应，因此，FDA建议要仔细考察生产病毒载体的细胞系的特征，因为这些特征可能会影响最终产品的安全性，例如存在致瘤序列（Tumorigenic Sequences），同时需要限制残留宿主细胞DNA含量和DNA的大小。当药物通过鞘内途径给药时，内毒素水平应保持在低于0.2 EU/kg（体重）/h（小时）。
对于设计用于治疗神经退行性疾病的产品，如果产品可能表现出不止一种作用方式（MoA），FDA建议评估产品的多种特性来帮助在初始临床研究期间建立检测矩阵（Matrix）或其他类似效力检测的评估方法。
GT产品与递送系统的兼容性的评估
很多基因治疗产品需要使用器械来递送，因此，在启动临床I期安全性研究之前，需要确保产品与递送装置的兼容性（21 CFR 312.23(a)(10)(iv)、21 CFR 312.23(a)(11)）。兼容性研究应该使用拟用于临床研究的最终配制的产品，并在模拟临床研究计划的条件下进行。
如果申请人计划使用的递送装置超出了已明确或批准的使用适应症范围，或者如果递送装置尚未获得FDA批准用于任何适应症，建议尽早与我们沟通，以确定需要哪些额外的信息来评估递送装置与拟议临床研究的研究产品一起使用时的安全性。
奥来恩如何帮助您高效成功完成GT产品的CMC研究和申报？
奥来恩CMC团队由多名具有跨国制药公司和FDA工作经历的成员组成。凭借扎实的专业技术、丰富的工业界和药政法规事务经验，奥来恩CMC团队已成功帮助客户召开与FDA的各种沟通会议（如INTERACT、Pre-IND、Type B/C、Pre-BLA等），起草并审阅了多个创新药的CMC申报资料。这些创新药涵盖各种产品（细胞和基因治疗产品、化药、单抗、双抗、ADC、器械组合等）。通过有效合作，奥来恩团队能够助力您的新药研发进程顺利、成功获得FDA的上市批准。如您有任何方面的需求，欢迎联系我们（邮箱：bd@aleonpharma.com；手机：17761872613）。
信息来源：
[1]. FDA Guidance for Industry: Chemistry, Manufacturing, and Control (CMC) Information for Human Gene Therapy Investigational New Drug Applications (INDs). January 2020.
[2]. FDA Guidance for Industry: Considerations for the Development of Chimeric Antigen Receptor (CAR) T Cell Products. March 2022.
[3]. FDA Guidance for Industry: Human Gene Therapy for Rare Diseases. January 2020.
[4]. FDA Guidance for Industry: Human Gene Therapy for Retinal Disorders. January 2020.
[5]. FDA Guidance for Industry: Human Gene Therapy for Neurodegenerative Diseases. October 2022.
[6]. FDA Guidance for Industry: Human Gene Therapy for Hemophilia. January 2020.
[7]. FDA Guidance for Industry: Manufacturing Changes and Comparability for Human Cellular and Gene Therapy Products (Draft). July 2023.
[8].《奥来恩药政前沿》第59期：FDA对基因治疗产品CMC研究的考量（一）.2023-07-27.https://mp.weixin.qq.com/s/r0vHhiw3TYfcXbTmPXHnyw.
